selife ®Resina de cromatografía de agarosa de flujo rápido 6FF

Resina de cromatografía de agarosa de flujo rápido

Seplife 6FF

selife ®6FF Resina para cromatografía de agarosa de flujo rápido Perfil del producto:

selife ® 6FF  resina de cromatografía de agarosa de flujo rápido  se forma por reticulación en Seplife ® 6B  medios de cromatografía de agarosa . Su estabilidad química y propiedades físicas mejoran significativamente con altos caudales, alta carga y baja adsorción específica. Tiene una alta tasa de recuperación y se puede reutilizar muchas veces. Se puede utilizar para  cromatografía de filtración en gel  y  purificación de proteínas ,  ácidos nucleicos  y  péptidos  aguas abajo de  biofarmacéuticos y bioingeniería .

selife ®6FF Cromatografía de flujo rápido en agarosa Parámetros de resina:

selife ®6FF Cromatografía de flujo rápido en agarosa Resina  Instrucción de prueba:

1.Embalaje de columnas
El embalaje se realiza de acuerdo con los procedimientos operativos estándar. Se debe garantizar que cada material esté a la temperatura de funcionamiento y que el gel debe desgasificarse antes de envasarse.
2.Equilibrio
Equilibre la columna con 2 a 5 volúmenes de columna de la balanza de carga, asegurándose de que la conductividad y el pH del efluente sean exactamente iguales que la conductividad y el pH del tampón de carga.
3.Carga de muestra
(1) La muestra se prepara con un tampón y la muestra turbia se centrifuga y filtra para cargarla. Las muestras con un contenido excesivo de sal y una concentración demasiado pequeña deben tratarse primero y luego cargarse.
(2) La separación de los componentes de la muestra por el medio se lleva a cabo de acuerdo con el peso molecular de los componentes, y primero se hace fluir el peso molecular.
(3) El volumen de carga es aproximadamente del 1 al 2 % del volumen de la columna y cuanto más pequeño, mejor rendimiento de separación.
4.Elución
La elución se llevó a cabo con tampón y el caudal y la composición del tampón se mantuvieron constantes durante la elución.
5.Regeneración
Por lo general, se lava con un tampón para equilibrarlo y se puede volver a utilizar. Algunas proteínas o lípidos inactivados no se pueden eliminar mediante lavado durante la regeneración y se pueden eliminar mediante limpieza in situ (CIP).
6.CIP
(1) Para una proteína unida a iones, se puede eliminar con un volumen de lecho de columna de 0,5 a 1 de NaCl 2 M.
(2) Para proteínas precipitadas, proteínas o lípidos unidos hidrofóbicamente, se pueden eliminar con 1 volumen de lecho de columna de NaOH 0,1 M. (3) Para proteínas, lípidos, etc. fuertemente unidos hidrofóbicamente, se puede lavar con 4 a 10 volúmenes de columna de etanol al 70% o isopropanol al 30%. Sin embargo, cabe señalar que la concentración del disolvente orgánico aumenta gradualmente en forma de gradiente; de ​​lo contrario, se generan fácilmente burbujas.
Una vez completada la limpieza, equilibre la columna con al menos 3 volúmenes de lecho de tampón de equilibrio hasta que el pH y la conductancia permanezcan sin cambios.
7.Almacenamiento
Sellado y almacenado a 4~30 ℃ (etanol al 20% en solución de almacenamiento), seco, ventilado, limpio, no congelado; Las columnas usadas se almacenan en una solución de etanol al 20% de 4°C.

selife ®6FF Cromatografía de flujo rápido en agarosa Resina  Precaución:

(1) El volumen de muestra debe concentrarse tanto como sea posible antes de usar la filtración en gel.
(2) La muestra debe clarificarse sin partículas.
(3) Para obtener la resolución más alta, el volumen de carga no puede exceder el 5% del volumen de la cama.
(4) La cromatografía en columna debe realizarse después de la muestra y el medio cromatográfico debe equilibrarse completamente con el tampón de elución.
(5) El lecho de la columna debe ser plano, libre de ranuras y burbujas de aire; de ​​lo contrario, deberá volver a montarse.
(6) Para proteger la estabilidad y actividad de la proteína, se selecciona una proteína de purificación tampón.
(7) Para evitar la interacción iónica no específica entre la proteína y el medio, se pueden agregar al tampón hasta 0,15 mol/L de NaCl.
(8) Según el peso molecular de la proteína objetivo, se selecciona el medio más cercano al rango de separación medio.
(9) El caudal debe controlarse estrictamente durante el proceso de elución y no demasiado rápido.
(10) Durante la carga y todo el proceso de elución, se evita que la superficie del cilindro se seque.
(11) Este producto debe evitar el contacto con agentes oxidantes y evitar la exposición prolongada al aire.