SP Seplife ®Resina de cromatografía de agarosa FF

Resina de cromatografía de agarosa  

SP seplife FF

SP Seplife ® Resina de cromatografía de agarosa FF Perfil del producto:

SP seplife ® FF  resina de cromatografía  es un nuevo altamente reticulado  resina de cromatografía de agarosa  desarrollado independientemente por Sunresin. Es una especie de propilo a base de ácido sulfónico unido sobre  resina de cromatografía de filtración en gel de agarosa . Fuerte resina de cromatografía de intercambio catiónico con alto caudal, baja contrapresión, alta carga dinámica, buena estabilidad química y propiedades mecánicas, baja adsorción no específica, alta tasa de recuperación, escalado conveniente, acorta el tiempo de producción y mejora la productividad. Es ampliamente utilizado en  separación de proteínas por intercambio iónico ,  ácidos nucleicos  y  péptidos  aguas abajo de  biofarmacéuticos y bioingeniería .

SP Seplife ® Parámetros de la resina de cromatografía de agarosa FF:

SP Seplife ® Resina de cromatografía de agarosa FF Instrucción de prueba:

1.Embalaje de columnas
El embalaje se realiza de acuerdo con los procedimientos operativos estándar. Se debe garantizar que cada material esté a la temperatura de funcionamiento y que el gel debe desgasificarse antes de envasarse.
2.Equilibrio
Equilibre la columna con 2 a 5 volúmenes de columna de la balanza de carga, asegurándose de que la conductividad y el pH del efluente sean exactamente iguales que la conductividad y el pH del tampón de carga.
La solución de equilibrio es una solución tampón de baja concentración como NaOAC, PBS y similares. Una solución de equilibrio comúnmente utilizada es el tampón de acetato de 0,1 mol/L, pH 5,0.
3.Carga de muestra
(1) La muestra se prepara con una solución de equilibrio y la muestra turbia se centrifuga y se filtra para cargarla. Las muestras con demasiada concentración de sal se procesan y luego se dispensan.
(2) En general, el producto objetivo se combina en una columna, las impurezas se eliminan con una solución en equilibrio y se selecciona un eluyente para lavar el producto objetivo.
(3) El grado en que el medio adsorbe los componentes de la muestra depende de la naturaleza cargada de la muestra, la fuerza iónica de la fase móvil y el pH. La concentración de sal es pequeña y el medio se adsorbe más firmemente en los componentes de la muestra. Cuando se utilizan medios de cromatografía SP, el pH recomendado es 1 unidad por encima del punto isoeléctrico del producto objetivo.
4.Elución
La elución se puede llevar a cabo aumentando la concentración de sal o aumentando el pH y, en general, aumentando la concentración de sal. Un eluyente de uso común (solución B), como por ejemplo: tampón acetato 0,1 mol/L + NaCl 2 mol/L, pH 5,0.
5.Regeneración
Generalmente, el tampón se lava con una alta concentración de sal (que contiene 1 ~ 2 mol/l de NaCl) o el pH se reduce 10 veces o más, y luego se lava con una solución de equilibrio de la proteína unida para equilibrar.
Si las proteínas o lípidos inactivados no se eliminan durante la regeneración, se pueden eliminar mediante limpieza in situ (CIP).
6.CIP
(1) Para las proteínas unidas mediante enlaces iónicos, se puede eliminar con un volumen de lecho de columna de 0,5 a 1 de NaCl 2 M.
(2) Para proteínas precipitadas, proteínas o lípidos unidos hidrófobamente, se puede lavar primero con un volumen de lecho de columna de NaOH 0,1 M y luego con una solución tampón de equilibrio hasta que el pH sea neutro.
(3) Para proteínas, lípidos, etc. fuertemente unidos hidrofóbicamente, lave con 4 a 10 veces el volumen del lecho de etanol al 70% o isopropanol al 30%. Tenga en cuenta que la concentración del disolvente orgánico aumenta gradualmente en forma de gradiente; de ​​lo contrario, es fácil crear burbujas.
7.Almacenamiento
Sellado y almacenado a 4~30°C (la solución de conservación es etanol al 20% + acetato de sodio 0,2 mol/L), lugar seco, ventilado y limpio, no se puede congelar;
La columna usada se almacena a 4~8°C, solución de etanol al 20 % + 0,2 mol/l de acetato de sodio.

SP Seplife ® Resina de cromatografía de agarosa FF Precaución:

(1) Selección de columna: Teóricamente, siempre que la columna sea lo suficientemente larga, se puede obtener la resolución ideal, pero como el caudal de la columna está relacionado con el gradiente de presión, la longitud de la columna aumenta para disminuir el caudal, el pico se vuelve más amplio y la resolución disminuye; el diámetro de la columna aumenta, provocando un aumento de la falta de uniformidad del flujo de líquido y una disminución significativa de la resolución.
(2) El pH y la fuerza iónica del tampón de elución deben controlarse estrictamente durante el proceso de purificación. La cromatografía en columna debe realizarse después de la muestra y el medio de cromatografía SP debe equilibrarse completamente con el tampón de elución.
(3) El lecho de la columna debe ser plano, sin ranuras ni burbujas de aire; de ​​lo contrario, deberá volver a embalarse.
(4) El caudal debe controlarse estrictamente durante el proceso de elución y no demasiado rápido.
(5) El volumen de la muestra debe ser pequeño y la concentración no debe ser demasiado alta.
(6) Durante la carga y todo el proceso de elución, se evita que la superficie del cilindro se seque.