CM Seplife ®Resina de cromatografía de agarosa FF

Resina de cromatografía de agarosa  

CM seplife FF

CM Seplife ® Resina de cromatografía de agarosa FF Perfil del producto:

CM seplife ® El medio de cromatografía FF es un nuevo tipo de medio de cromatografía de agarosa altamente reticulado desarrollado independientemente por Sunresin. Es un catión débil formado al unir grupos carboximetilo a un medio de cromatografía de filtración en gel de agarosa.  Medios de cromatografía de intercambio iónico. . Tiene alto caudal, baja contrapresión, alta carga dinámica, buena estabilidad química y propiedades mecánicas, baja adsorción no específica, alta tasa de recuperación, fácil de ampliar, puede acortar el tiempo de producción y mejorar la eficiencia de la producción. Ampliamente utilizado en  purificación por cromatografía de intercambio iónico  de proteínas posteriores,  ácidos nucleicos  y  péptidos  en  biofarmacéuticos y bioingeniería .

CM Seplife ® Parámetros de la resina de cromatografía de agarosa FF:

CM Seplife ® Instrucción de prueba de resina de cromatografía de agarosa FF:

1.Embalaje de columnas
Operación de embalaje de acuerdo con los procedimientos operativos estándar. Se debe asegurar que cada material esté a la temperatura de trabajo y es necesario desgasificar el gel antes de empacar.
2.Equilibrio
Equilibre la columna con 2 a 5 veces el volumen del lecho de la solución de equilibrio de carga. Asegúrese de que la conductividad y el pH del efluente sean exactamente los mismos que la conductividad y el pH del tampón de carga. La solución de equilibrio es una solución tampón de baja concentración, como Tris, PBS, etc.
3.cargando
(1) La muestra se prepara con la solución de equilibrio y la muestra turbia debe centrifugarse y filtrarse antes de cargarla. Las muestras con demasiada concentración de sal se preparan después del procesamiento.
(2) Generalmente, el producto objetivo se une a la columna, las impurezas se eliminan con la solución de equilibrio y luego se selecciona el eluyente para lavar el producto objetivo.
(3) El grado en que el medio adsorbe los componentes de la muestra depende de las propiedades cargadas de la muestra, la fuerza iónica de la fase móvil y el valor del pH. La concentración de sal es pequeña y el medio adsorbe los componentes de la muestra con mayor firmeza. Cuando se utilizan medios de cromatografía CM, el valor de pH recomendado es 1 unidad mayor que el punto isoeléctrico del producto objetivo.
4.Elución
Aumente la concentración de sal o aumente el valor de pH para la elución, comúnmente utilizado para aumentar la concentración de sal.
5.Regeneración
Generalmente, primero lave con un tampón de alta concentración de sal (que contenga 1 ~ 2 mol/L de NaCl) o reduzca el pH en más de 10 veces el volumen de la columna y luego lave hasta alcanzar el equilibrio con la solución de equilibrio al unir la proteína.
Si hay proteínas o lípidos inactivados que no se pueden eliminar durante la regeneración, se pueden eliminar con CIP.
6.Limpieza en el lugar
(1) Para la proteína unida por enlace iónico, se puede eliminar entre 0,5 y 1 veces el volumen del lecho de NaCl 2 M.
(2) Para proteínas precipitadas, proteínas o lípidos unidos hidrofóbicamente, primero puede enjuagar con un volumen de lecho 1 M de NaOH 0,1 M y luego lavar con una solución tampón de equilibrio hasta que el pH sea neutro.
(3) Para proteínas y lípidos con fuerte unión hidrófoba, lave con 4 a 10 veces el volumen del lecho de etanol al 70 % o alcohol isopropílico al 30 %. Cabe señalar que la concentración de disolvente orgánico aumenta gradualmente en forma de gradiente, de lo contrario es fácil que se generen burbujas.
7.Almacenamiento
Sellado y almacenado a 4~30°C (la solución de conservación es etanol al 20%) en un lugar seco, ventilado y limpio, y no se puede congelar; Las columnas usadas se almacenan a 4~8°C, solución de etanol al 20%.
8.Transporte
Evite la luz solar, la lluvia y la fuerte presión durante el transporte, y está estrictamente prohibido transportar con materiales tóxicos y nocivos.

CM Seplife ® Resina de cromatografía de agarosa FF Asuntos que necesitan atención:

(1)Selección de columna: en teoría, siempre que la columna sea lo suficientemente larga, se puede obtener la resolución ideal, pero debido a que el caudal de la columna está relacionado con el gradiente de presión, aumentar la longitud de la columna hace que el caudal sea más lento, el pico se amplía y la resolución disminuye; el diámetro de la columna aumenta, de modo que aumenta la irregularidad del flujo de líquido y la resolución disminuye significativamente. A
(2) El pH y la fuerza iónica del tampón de elución deben controlarse estrictamente durante el proceso de purificación. La muestra y el medio de cromatografía CM deben equilibrarse completamente con tampón de elución antes de la cromatografía en columna. A
(3) El lecho de la columna instalado debe ser plano y libre de canales y burbujas; de lo contrario, deberá reinstalarse.
(4) El caudal debe controlarse estrictamente durante la elución y no demasiado rápido.
(5) El volumen de la muestra debe ser pequeño y la concentración no debe ser demasiado alta.
(6) Evite que el cilindro se seque durante la adición de la muestra y todo el proceso de elución.