Nuevas resinas Oligo dT para purificación y aislamiento de ARNm: exploración de nueva tecnología basada en perlas magnéticas sembradas y resinas de estireno/DVB inyectadas

El nuevo Sunresin Seplife ®La resina de afinidad Oligo dT está diseñada para la purificación y aislamiento de ARNm de procesos de fabricación de transcripción in vitro (IVT). Utilizando los 20 años de experiencia de Sunresin en la fabricación de resinas especiales, hemos diseñado una tecnología única que fabrica una resina polimérica de 50 micrones con tamaños de partículas muy uniformes mediante el hinchamiento de las semillas. La resina es una resina de poliestireno divinilbenceno reticulada funcionalizada con oligo dT20. La resina captura eficazmente el ARNm de los componentes del proceso de reacción de transcripción, como las enzimas y el ADN plasmídico.

selife ® Oligo dT ha sido diseñado para satisfacer la creciente demanda de selectividad, capacidad y purificación posterior a gran escala de una variedad de construcciones de ARNm utilizadas en vacunas, como la vacuna de ARNm COVID-19, vacunas oncológicas, vacunas contra el SIDA, tratamiento y prevención de enfermedades raras y otras enfermedades importantes. Esta resina permite capturar selectivamente el ARNm a través de la cola poliadenilada (poliA) utilizando sal simple (NaCl 0,5 M) y pasos de purificación a base de agua.

Las características principales de Oligo dT combinan una sencilla purificación de ARNm a partir de una mezcla de transcripción cruda para eliminar eficazmente el ADN plasmídico y otros componentes de IVT, un flujo de trabajo simplificado gracias a la fácil adaptación a diferentes tipos de columnas y una excelente escalabilidad. Por supuesto, la resina ha sido diseñada para mostrar una excelente estabilidad a temperaturas de hasta 65°C y a los álcalis para un CIP eficiente.

La tecnología de resina única desarrollada por Sunresin permite fabricar lotes de resina de 50 kg, lo que reduce el riesgo de variabilidad y ofrece las mejores capacidades de fabricación utilizando condiciones GMP y estrictos controles de calidad.

La superficie de las microesferas de resina se modifica (mediante una tecnología patentada) para volverse más hidrófilas y reducir la adsorción no específica. Esto se logra mediante la adición de un ligando formado por un brazo espaciador de cadena larga, de modo que se reduce el impedimento estérico, se aumenta la tasa de transferencia de masa y se garantiza una unión dinámica alta. Luego, la superficie de las perlas se funcionaliza con poli (dT) para permitir la captura del ARNm mediante el emparejamiento de bases con la cola poliA del ARNm.

En este póster presentamos aplicaciones en la purificación de ARNm de 1200 nt utilizando Oligo dT mediante captura y liberación en condiciones estándar de purificación de ARNm. Además, el recubrimiento realizado sobre la resina permite la reducción del ADN plasmídico y otros componentes de la mezcla de transcripción.

También presentamos las resinas magnéticas recientemente desarrolladas funcionalizadas con oligo dT para una fácil purificación y separación en las etapas de desarrollo de I+D. Estas perlas magnéticas parten de un núcleo de resina de poliestireno divinilbenceno fabricado mediante una tecnología de siembra única que permite fabricar perlas monotamaño de 1 a 3 micras. Luego, estas perlas se recubren con Fe3O4 y luego se recubren completamente con una cubierta de poliuretano que protege completamente las perlas para que no liberen el material paramagnético.

Estas partículas magnéticas permiten una separación fácil y rápida del ARNm, por lo que se mejora el proceso de desarrollo y detección de nuevas terapias genéticas.