CM Seplife ®Resina de cromatografía de agarosa FF

Resina de cromatografía de agarosa  

CM seplife FF

CM Seplife ® Perfil del producto de resina de cromatografía de agarosa FF:

CM seplife ®El medio cromatográfico FF es un nuevo tipo de medio cromatográfico de agarosa altamente reticulado, desarrollado independientemente por Sunresin. Se trata de un catión débil formado mediante la unión de grupos carboximetilo al medio cromatográfico de filtración en gel de agarosa.  Medios de cromatografía de intercambio iónico Presenta un alto caudal, baja contrapresión, alta carga dinámica, buena estabilidad química y propiedades mecánicas, baja adsorción no específica, alta tasa de recuperación, fácil de escalar, lo que permite acortar el tiempo de producción y mejorar la eficiencia. Ampliamente utilizado en...  purificación por cromatografía de intercambio iónico  de proteínas aguas abajo,  ácidos nucleicos  y  péptidos  en  biofarmacéuticos y bioingeniería .

CM Seplife ®Parámetros de la resina de cromatografía de agarosa FF:

CM Seplife ®Instrucciones de prueba de resina de cromatografía de agarosa FF:

1. Empaquetamiento de columnas
El proceso de envasado se realiza de acuerdo con los procedimientos operativos estándar. Es necesario garantizar que cada material esté a temperatura de trabajo y que el gel se desgasifique antes del envasado.
2. Equilibrio
Equilibre la columna con una solución de equilibrio de carga de 2 a 5 veces el volumen del lecho. Asegúrese de que la conductividad y el pH del efluente sean exactamente iguales a los del tampón de carga. La solución de equilibrio es una solución tampón de baja concentración, como Tris, PBS, etc.
3.cargando
(1) La muestra se prepara con la solución de equilibrio. La muestra turbia debe centrifugarse y filtrarse antes de cargarla. Las muestras con una concentración excesiva de sal se preparan después del procesamiento.
(2) Generalmente, el producto objetivo se une a la columna, las impurezas se lavan con la solución de equilibrio y luego se selecciona el eluyente para lavar el producto objetivo.
(3) El grado de adsorción de los componentes de la muestra por el medio depende de las propiedades de carga de la muestra, la fuerza iónica de la fase móvil y el valor de pH. La concentración de sal es baja, y el medio adsorbe los componentes de la muestra con mayor firmeza. Al utilizar medios de cromatografía CM, el valor de pH recomendado es 1 unidad mayor que el punto isoeléctrico del producto objetivo.
4.Elución
Aumentar la concentración de sal o aumentar el valor de pH para la elución, comúnmente utilizado para aumentar la concentración de sal.
5.Regeneración
Generalmente, primero se lava con un tampón de alta concentración de sal (que contenga 1~2 mol/L de NaCl) o se reduce el pH en más de 10 veces el volumen de la columna y luego se lava hasta el equilibrio con la solución de equilibrio cuando se une la proteína.
Si hay proteínas o lípidos inactivados que no se pueden lavar durante la regeneración, se pueden eliminar con CIP.
6. Limpieza en el lugar
(1) Para la proteína unida por enlace iónico, se puede eliminar con 0,5 a 1 veces el volumen del lecho de NaCl 2M.
(2) Para proteínas precipitadas, proteínas unidas hidrofóbicamente o lípidos, primero puede enjuagar con un volumen de lecho de 1 M de NaOH 0,1 M y luego lavar con una solución tampón de equilibrio hasta que el pH sea neutro.
(3) Para proteínas y lípidos con fuerte unión hidrofóbica, lave con etanol al 70 % o alcohol isopropílico al 30 % de 4 a 10 veces el volumen del lecho. Tenga en cuenta que la concentración del disolvente orgánico aumenta gradualmente en gradiente; de ​​lo contrario, es fácil que se formen burbujas.
7. Almacenamiento
Sellado y almacenado a 4~30 °C (la solución de conservación es 20 % de etanol) en un lugar seco, ventilado y limpio, y no se puede congelar; las columnas usadas se almacenan a 4~8 °C, solución de etanol al 20 %.
8.Transporte
Evite la luz solar, la lluvia y la presión fuerte durante el transporte, y está estrictamente prohibido transportar con materiales tóxicos y nocivos.

CM Seplife ® Resina de cromatografía de agarosa FF Asuntos que requieren atención:

(1) Selección de la columna: En teoría, siempre que la columna sea lo suficientemente larga, se puede obtener la resolución ideal, pero debido a que el caudal de la columna está relacionado con el gradiente de presión, aumentar la longitud de la columna hace que el caudal sea más lento, el pico se ensanche y la resolución disminuya; el diámetro de la columna aumenta, de modo que la irregularidad del flujo del líquido aumenta y la resolución disminuye significativamente.
(2) El pH y la fuerza iónica del tampón de elución deben controlarse estrictamente durante el proceso de purificación. La muestra y el medio cromatográfico CM deben equilibrarse completamente con el tampón de elución antes de la cromatografía en columna.
(3)La base de la columna instalada debe ser plana y libre de canales y burbujas, de lo contrario debe reinstalarse.
(4)El caudal debe controlarse estrictamente durante la elución y no ser demasiado rápido.
(5)El volumen de la muestra debe ser pequeño y la concentración no debe ser demasiado alta.
(6)Evite que el cilindro se seque durante la adición de la muestra y durante todo el proceso de elución.