SP Seplife ®Resina de cromatografía de agarosa FF

Resina de cromatografía de agarosa  

SP seplife FF

SP Seplife ® Perfil del producto de resina de cromatografía de agarosa FF:

SP seplife ® FF  resina de cromatografía  es un nuevo altamente reticulado  resina de cromatografía de agarosa  Desarrollado independientemente por Sunresin. Es un tipo de ácido sulfónico con enlaces propílicos.  resina de cromatografía de filtración en gel de agarosa Resina de cromatografía de intercambio catiónico potente con alto caudal, baja contrapresión, alta carga dinámica, buena estabilidad química y propiedades mecánicas, baja adsorción no específica, alta tasa de recuperación, escalabilidad conveniente, reducción del tiempo de producción y mejora de la productividad. Ampliamente utilizada en  separación de proteínas por intercambio iónico ,  ácidos nucleicos  y  péptidos  aguas abajo de  biofarmacéuticos y bioingeniería .

SP Seplife ®Parámetros de la resina de cromatografía de agarosa FF:

SP Seplife ® Resina de cromatografía de agarosa FF Instrucciones de prueba:

1. Empaquetamiento de columnas
El envasado se realiza de acuerdo con los procedimientos operativos estándar. Es necesario garantizar que cada material esté a temperatura de funcionamiento y que el gel se desgasifique antes de envasarlo.
2. Equilibrio
Equilibrar la columna con 2 a 5 volúmenes de columna del balance de carga, asegurándose de que la conductividad y el pH del efluente sean exactamente iguales a la conductividad y el pH del tampón de carga.
La solución de equilibrio es una solución tampón de baja concentración, como NaOAC, PBS, etc. Una solución de equilibrio comúnmente utilizada es el tampón de acetato de 0,1 mol/l, pH 5,0.
3. Carga de muestra
(1) La muestra se prepara con una solución de equilibrio, y la muestra turbia se centrifuga y filtra para su carga. Las muestras con exceso de concentración de sal se procesan y se dispensan.
(2)En general, el producto objetivo se combina en una columna, las impurezas se lavan con una solución de equilibrio y se selecciona un eluyente para lavar el producto objetivo.
(3) El grado de adsorción de los componentes de la muestra por el medio depende de la naturaleza de la carga de la muestra, la fuerza iónica de la fase móvil y el pH. La concentración de sal es baja, y el medio se adsorbe a los componentes de la muestra con mayor firmeza. Al utilizar medios de cromatografía SP, el pH recomendado es 1 unidad por encima del punto isoeléctrico del producto objetivo.
4.Elución
La elución puede realizarse aumentando la concentración de sal o el pH, y generalmente incrementando la concentración de sal. Un eluyente común (solución B) es: 0,1 mol/L de tampón de acetato + 2 mol/L de NaCl, pH 5,0.
5.Regeneración
Generalmente, el tampón se lava con una alta concentración de sal (que contiene 1~2 mol/L de NaCl) o se reduce el pH 10 veces o más, y luego se lava con una solución de equilibrio de la proteína unida para equilibrar.
Si las proteínas o los lípidos inactivados no se lavan durante la regeneración, se pueden eliminar mediante limpieza en el lugar (CIP).
6.CIP
(1) Para las proteínas unidas por enlace iónico, se puede eliminar con un volumen de lecho de columna de 0,5 a 1 de 2 M NaCl.
(2) Para proteínas precipitadas, proteínas unidas hidrofóbicamente o lípidos, se pueden lavar primero con 1 volumen de lecho de columna de NaOH 0,1 M y luego con una solución tampón de equilibrio hasta que el pH sea neutro.
(3) Para proteínas, lípidos, etc., con una fuerte unión hidrofóbica, lave con etanol al 70 % o isopropanol al 30 % de 4 a 10 veces el volumen del lecho. Tenga en cuenta que la concentración del disolvente orgánico aumenta gradualmente en gradiente; de ​​lo contrario, es fácil que se formen burbujas.
7. Almacenamiento
Sellado y almacenado a 4~30 °C (la solución de conservación es 20 % de etanol + 0,2 mol/L de acetato de sodio), lugar seco, ventilado y limpio, no se puede congelar;
La columna usada se almacena a 4~8 °C, solución de etanol al 20 % + 0,2 mol/L de acetato de sodio.

SP Seplife ® Resina de cromatografía de agarosa FF Precaución:

(1) Selección de la columna: teóricamente, siempre que la columna sea lo suficientemente larga, se puede obtener la resolución ideal, pero como el caudal de la columna está relacionado con el gradiente de presión, la longitud de la columna aumenta para reducir el caudal, el pico se vuelve más ancho y la resolución disminuye; el diámetro de la columna aumenta, lo que provoca un aumento en la no uniformidad del flujo de líquido y una disminución significativa en la resolución.
(2) El pH y la fuerza iónica del tampón de elución deben controlarse estrictamente durante el proceso de purificación. La cromatografía en columna debe realizarse después de que la muestra y el medio de cromatografía SP estén completamente equilibrados con el tampón de elución.
(3)El lecho de la columna debe ser plano, sin ranuras ni burbujas de aire, de lo contrario debe ser reempacado.
(4)El caudal debe controlarse estrictamente durante el proceso de elución y no ser demasiado rápido.
(5)El volumen de la muestra debe ser pequeño y la concentración no debe ser demasiado alta.
(6)Durante la carga y todo el proceso de elución, se evita que la superficie del cilindro se seque.