Seplife ®Resina de cromatografía de agarosa de flujo rápido 6FF

Resina de cromatografía de agarosa de flujo rápido

Seplife 6FF

Seplife ®6FF Resina de cromatografía de agarosa de flujo rápido Perfil del producto:

Seplife ® 6FF  resina de cromatografía de agarosa de flujo rápido  Se forma mediante reticulación en Seplife. ® 6B  medios de cromatografía de agarosa Su estabilidad química y propiedades físicas se mejoran significativamente con altos caudales, alta carga y baja adsorción específica. Presenta una alta tasa de recuperación y puede reutilizarse muchas veces. Se puede utilizar para...  cromatografía de filtración en gel  y  purificación de proteínas ,  ácidos nucleicos  y  péptidos  aguas abajo de  biofarmacéuticos y bioingeniería .

Seplife ®Cromatografía de agarosa de flujo rápido 6FF Parámetros de la resina:

Seplife ®Cromatografía de agarosa de flujo rápido 6FF Resina  Instrucciones de prueba:

1. Empaquetamiento de columnas
El envasado se realiza de acuerdo con los procedimientos operativos estándar. Es necesario garantizar que cada material esté a temperatura de funcionamiento y que el gel se desgasifique antes de envasarlo.
2. Equilibrio
Equilibrar la columna con 2 a 5 volúmenes de columna del balance de carga, asegurándose de que la conductividad y el pH del efluente sean exactamente iguales a la conductividad y el pH del tampón de carga.
3. Carga de muestra
(1) La muestra se prepara con un tampón y la muestra turbia se centrifuga y filtra para su carga. Las muestras con un contenido excesivo de sal y una concentración demasiado baja deben tratarse primero y luego cargarse.
(2) La separación de los componentes de la muestra por el medio se lleva a cabo de acuerdo con el peso molecular de los componentes, y primero se extrae el peso molecular.
(3) El volumen de carga es de aproximadamente el 1-2% del volumen de la columna, y cuanto menor sea, mejor será el rendimiento de separación.
4.Elución
La elución se realizó con tampón y el caudal y la composición del tampón se mantuvieron constantes durante la elución.
5.Regeneración
Generalmente se lava con un tampón para equilibrar y se puede reutilizar. Algunas proteínas o lípidos inactivados no se pueden eliminar durante la regeneración y pueden eliminarse mediante limpieza in situ (CIP).
6.CIP
(1) Para una proteína unida a iones, se puede eliminar con un volumen de lecho de columna de 0,5 a 1 de 2 M NaCl.
(2) Para proteínas precipitadas, proteínas hidrofóbicamente unidas o lípidos, se puede eliminar con un volumen de lecho de columna de NaOH 0,1 M. (3) Para proteínas, lípidos, etc., fuertemente hidrofóbicamente unidos, se puede lavar con 4 a 10 volúmenes de columna de etanol al 70 % o isopropanol al 30 %. Sin embargo, es importante tener en cuenta que la concentración del disolvente orgánico se incrementa gradualmente en gradiente, ya que de lo contrario se generan burbujas con facilidad.
Una vez completada la limpieza, equilibre la columna con al menos 3 volúmenes de lecho de tampón de equilibrio hasta que el pH y la conductancia permanezcan sin cambios.
7. Almacenamiento
Sellado y almacenado a 4~30 °C (20 % de etanol en solución de almacenamiento), seco, ventilado, limpio, no congelado; las columnas usadas se almacenan en 4 °C, solución de etanol al 20 %.

Seplife ®Cromatografía de agarosa de flujo rápido 6FF Resina  Precaución:

(1)El volumen de la muestra debe concentrarse tanto como sea posible antes de utilizar la filtración en gel.
(2)La muestra debe clarificarse sin partículas.
(3)Para obtener la máxima resolución, el volumen de carga no puede superar el 5 % del volumen del lecho.
(4)La cromatografía en columna debe realizarse después de que la muestra y el medio cromatográfico estén completamente equilibrados con el tampón de elución.
(5)El lecho de la columna debe ser plano, libre de ranuras y burbujas de aire, de lo contrario deberá ser reensamblado.
(6)Para proteger la estabilidad y la actividad de la proteína, se selecciona una proteína de purificación tampón.
(7)Para evitar la interacción iónica no específica entre la proteína y el medio, se puede añadir hasta 0,15 mol/L de NaCl al tampón.
(8)De acuerdo con el peso molecular de la proteína objetivo, se selecciona el medio más cercano al rango de separación medio.
(9)El caudal debe controlarse estrictamente durante el proceso de elución y no ser demasiado rápido.
(10)Durante la carga y todo el proceso de elución, se evita que la superficie del cilindro se seque.
(11)Este producto debe evitar el contacto con agentes oxidantes y evitar la exposición prolongada al aire.