Nuevas resinas Oligo dT para la purificación y aislamiento de ARNm: exploración de una nueva tecnología basada en perlas magnéticas sembradas y resinas de estireno/DVB inyectadas

El nuevo Sunresin Seplife ®La resina de afinidad Oligo dT está diseñada para la purificación y el aislamiento de ARNm en procesos de transcripción in vitro (IVT). Gracias a los 20 años de experiencia de Sunresin en la fabricación de resinas especiales, hemos diseñado una tecnología única que produce una resina polimérica de 50 micras con tamaños de partícula muy uniformes mediante hinchamiento de semillas. Esta resina es una resina de poliestireno divinilbenceno reticulado funcionalizada con oligo dT20. Esta resina captura eficazmente el ARNm de los componentes del proceso de transcripción, como enzimas y ADN plasmídico.

Seplife ®Oligo dT se ha diseñado para satisfacer la creciente demanda de selectividad, capacidad y purificación posterior a gran escala de una gama de construcciones de ARNm utilizadas en vacunas, como la vacuna de ARNm contra la COVID-19, vacunas oncológicas, vacunas contra el SIDA, el tratamiento y la prevención de enfermedades raras y otras enfermedades graves. Esta resina permite capturar selectivamente el ARNm a través de la cola poliadenilada (poliA) mediante pasos de purificación con sal simple (NaCl 0,5 M) y agua.

Las principales características de Oligo dT incluyen la fácil purificación de ARNm a partir de la mezcla de transcripción cruda para eliminar eficazmente el ADN plasmídico y otros componentes de la IVT, un flujo de trabajo simplificado gracias a su fácil adaptación a diferentes tipos de columnas y una excelente escalabilidad. Además, la resina ha sido diseñada para ofrecer una excelente estabilidad a temperaturas de hasta 65 °C y a álcalis para una CIP eficiente.

La exclusiva tecnología de resina desarrollada por Sunresin permite fabricar lotes de resina de 50 kg, disminuyendo así el riesgo de variabilidad y las mejores capacidades de fabricación de su clase utilizando condiciones GMP y estrictos controles de control de calidad.

La superficie de las microesferas de resina se modifica mediante una tecnología patentada para aumentar su hidrofilia y reducir la adsorción inespecífica. Esto se logra añadiendo un ligando compuesto por un brazo espaciador de cadena larga, lo que reduce el impedimento estérico, aumenta la tasa de transferencia de masa y garantiza una alta unión dinámica. Posteriormente, la superficie de las microesferas se funcionaliza con poli(dT) para permitir la captura del ARNm mediante el apareamiento de bases con la cola de poliA del ARNm.

En este póster, presentamos aplicaciones en la purificación de ARNm de 1200 nt con Oligo dT mediante captura y liberación en condiciones estándar de purificación de ARNm. Además, el recubrimiento de la resina permite la reducción del ADN plasmídico y otros componentes de la mezcla de transcripción.

También presentamos las nuevas resinas magnéticas funcionalizadas con oligo dT para facilitar su purificación y separación en las etapas de desarrollo de I+D. Estas perlas magnéticas se fabrican a partir de un núcleo de resina de poliestireno divinilbenceno, fabricado mediante una tecnología de siembra única que permite obtener perlas monotamaño de 1 a 3 micras. Estas perlas se recubren con Fe₃O₄ y, finalmente, con una capa de poliuretano que las protege completamente de la liberación del material paramagnético.

Estas partículas magnéticas permiten una separación fácil y rápida del ARNm, mejorando así el proceso de desarrollo y selección de nuevas terapias genéticas.