Seplife®6FF

Resina de cromatografía de agarosa de flujo rápido

Seplife 6FF

Perfil del producto:
Seplife® 6FFresina de cromatografía de agarosa de flujo rápidoestá formado por reticulación en Seplife® 6Bmedios de cromatografía de agarosa. Su estabilidad química y propiedades físicas mejoran significativamente con altos índices de flujo, alta carga y baja adsorción específica. Tiene una alta tasa de recuperación y se puede reutilizar muchas veces. Se puede utilizar paracromatografía de filtración en gelypurificación de proteínas,ácidos nucleicosypéptidosaguas abajo debiofarmacéuticos y bioingeniería.

Parámetros de resina:

Instrucción de prueba:
1.Embalaje de columna
El embalaje se realiza de acuerdo con los procedimientos operativos estándar. Debe asegurarse que cada material esté a la temperatura de funcionamiento y que el gel deba desgasificarse antes de envasarse.
2.Equilibrio
Equilibre la columna con 2 a 5 volúmenes de columna del balance de carga, asegurándose de que la conductividad y el pH del efluente sean exactamente iguales a la conductividad y el pH del tampón de carga.
Carga 3.Sample
(1) La muestra se prepara con un tampón y la muestra turbia se centrifuga y filtra para cargar. Las muestras con un contenido excesivo de sal y una concentración demasiado pequeña deben tratarse primero y luego cargarse.
(2) La separación de los componentes de la muestra por el medio se lleva a cabo de acuerdo con el peso molecular de los componentes, y primero se extrae el peso molecular.
(3) El volumen de carga es aproximadamente el 1-2% del volumen de la columna, y cuanto más pequeño, mejor rendimiento de separación.
4 elución
La elución se llevó a cabo con tampón y el caudal y la composición del tampón se mantuvieron constantes durante la elución.
5.Regeneración
Por lo general, se lava con un tampón para equilibrar y se puede volver a utilizar. Algunas proteínas o lípidos inactivados no se pueden lavar durante la regeneración y se pueden eliminar mediante limpieza in situ (CIP).
6.CIP
(1) Para una proteína unida a iones, se puede eliminar con un volumen de lecho de columna de 0,5 a 1 de NaCl 2 M.
(2) Para proteínas precipitadas, proteínas o lípidos unidos hidrofóbicamente, se puede eliminar con 1 volumen de lecho de columna de NaOH 0,1 M. (3) Para proteínas, lípidos, etc. fuertemente unidos hidrofóbicamente, puede lavarse con 4 a 10 volúmenes de columna de etanol al 70% o isopropanol al 30%. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que la concentración del disolvente orgánico aumenta gradualmente en forma de gradiente, de lo contrario se generan fácilmente burbujas.
Una vez completada la limpieza, equilibre la columna con al menos 3 volúmenes de lecho de tampón de equilibrio hasta que el pH y la conductancia permanezcan sin cambios.
7.Almacenamiento
Sellado y almacenado a 4 ~ 30 ℃ (etanol al 20% en solución de almacenamiento), seco, ventilado, limpio, no congelado; Las columnas usadas se almacenan en una solución de etanol al 20% al 4 l.

Precaución:
(1) El volumen de la muestra debe concentrarse tanto como sea posible antes de utilizar la filtración en gel.
(2) La muestra debe clarificarse sin partículas.
(3) Para obtener la máxima resolución, el volumen de carga no puede exceder el 5% del volumen del lecho.
(4) La cromatografía en columna debe realizarse después de la muestra y el medio cromatográfico debe equilibrarse completamente con el tampón de elución.
(5) El lecho de la columna debe ser plano, sin ranuras ni burbujas de aire; de ​​lo contrario, debe volver a ensamblarse.
(6) Para proteger la estabilidad y la actividad de la proteína, se selecciona una proteína tampón de purificación.
(7) Para evitar la interacción iónica inespecífica entre la proteína y el medio, se puede añadir al tampón hasta 0,15 mol / L de NaCl.
(8) De acuerdo con el peso molecular de la proteína diana, se selecciona el medio más cercano al rango de separación medio.
(9) El caudal debe controlarse estrictamente durante el proceso de elución y no demasiado rápido.
(10) Durante la carga y todo el proceso de elución, se evita que la superficie del cilindro se seque.
(11) Este producto debe evitar el contacto con agentes oxidantes y evitar la exposición prolongada al aire.