Resina de cromatografía de agarosa de flujo rápido
SePlife 6ff
SEPLIFE®6ff FLUJO FUNDO AGAROSO CROMATOGRAFÍA DE RESINA PROFERTES DEL PRODUCTO:
SEPLIFE® 6FF resina de cromatografía de agarosa de flujo rápido se forma mediante reticulación en Seplife® 6B cromatografía de agarosa medios. Su estabilidad química y propiedades físicas se mejoran significativamente con altas caudales, alta carga y baja adsorción específica. Tiene una alta tasa de recuperación y se puede reutilizar muchas veces. Se puede usar para cromatografía de filtración en gel y purificación de proteínas, ácidos nucleicos y péptidos río abajo de biofarmacéuticos y bioingeniería.
SEPLIFE®6FFF cromatografía de agarosa de flujo rápido Parámetros de resina:
| Código de resina | SEPLIFE® 6FF |
| Apariencia | Cuentas de la esfera blanca |
| Tamaño de partícula (μm) | 45 ～ 165 |
| Matriz | 6% de agarosa reticulada |
| Caudal (cm/h) | <300 |
| Presión (MPA) | 0.2 |
| estabilidad de pH | 2 ~ 12 (a largo plazo), 2 ~ 14 (a corto plazo, CIP) |
| Solicitud | Proteínas, ácidos nucleicos y péptidos aguas abajo de
biofarmacéuticos y bioingeniería |
| Estabilidad química | Solución estable en tampón de agua: 2m NaOH; 70% de etanol, 30%
isopropanol, 30% de acetonitrilo, SDS al 1%, guanidina 6M
clorhidrato, 8m urea. |
| Límite de exclusión | 10000 ~ 4 × 106 globulina |
Condiciónes de la prueba: Columna de cromatografía 16 mm * 300 mm; Altura de la cama de columna 15 cm; temperatura 25 ℃;
La fase móvil fue de 0.1 mol / L NaCl. |
SEPLIFE®6FFF cromatografía de agarosa de flujo rápido Resina Instrucción de prueba:
1. Embalaje de columna
El embalaje se realiza de acuerdo con los procedimientos operativos estándar. Debe asegurarse de que cada material esté a temperatura de funcionamiento y que el gel debe desgasificarse antes de empacar.
2.Equilibro
Equilibrar la columna con 2 a 5 volúmenes de columna del balance de carga, asegurándose de que la conductividad y el pH del efluente sean exactamente los mismos que la conductividad y el pH del tampón de carga.
3. Carga de muestra
(1) La muestra se prepara con un tampón, y la muestra turbia se centrifuge y se filtra para la carga. Las muestras con contenido de sal excesivo y concentración demasiado pequeña deben tratarse primero y luego cargarse.
(2) La separación de los componentes de la muestra por el medio se lleva a cabo de acuerdo con el peso molecular de los componentes, y el peso molecular se fluye primero.
(3) El volumen de carga es aproximadamente 1-2% del volumen de la columna, y cuanto más pequeño, mejor rendimiento de separación.
4.Elución
La elución se llevó a cabo con tampón, y la caudal y la composición del tampón se mantuvieron constantes durante la elución.
5. Regeneración
Por lo general, se lava con un tampón para equilibrar y se puede usar nuevamente. Algunas proteínas o lípidos inactivados no pueden lavarse durante la regeneración y pueden eliminarse mediante la limpieza en el lugar (CIP).
6.cip
(1) Para una proteína unida a iones, se puede eliminar con 0.5 a 1 volumen de lecho de columna de NaCl 2 M.
(2) Para las proteínas precipitadas, proteínas o lípidos unidos hidrófobicamente, se puede eliminar con un volumen de lecho de 1 columna de NaOH 0.1 M. (3) Para proteínas, lípidos, etc. unidas fuertemente hidrofóbicamente, se puede lavar con 4 a 10 volúmenes de columna de etanol al 70% o al 30% de isopropanol. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que la concentración del solvente orgánico aumenta gradualmente de manera gradiente; de lo contrario, las burbujas se generan fácilmente.
Una vez completada la limpieza, equilibre la columna con al menos 3 volúmenes de tampón de equilibrio hasta que el pH y la conductancia permanezcan sin cambios.
7.macenaje
Sellado y almacenado a 4 ~ 30 ℃ (etanol al 20% en solución de almacenamiento), seco, ventilado, limpio, no congelado; Las columnas usadas se almacenan en 4 ℃, solución de etanol al 20%.
SEPLIFE®6FFF cromatografía de agarosa de flujo rápido Resina Precaución:
(1) El volumen de la muestra debe concentrarse tanto como sea posible antes de usar la filtración en gel.
(2) La muestra debe aclararse sin partículas.
(3) Para obtener la resolución más alta, el volumen de carga no puede exceder el 5% del volumen de la cama.
(4) La cromatografía de columna debe realizarse después de la muestra y el medio cromatográfico debe equilibrarse a fondo con el tampón de elución.
(5) El lecho de la columna debe estar plano, libre de surcos y burbujas de aire, de lo contrario, debe reensamblarse.
(6) Para proteger la estabilidad y la actividad de la proteína, se selecciona una proteína de purificación del tampón.
(7) Para evitar la interacción iónica no específica entre la proteína y el medio, se puede agregar hasta 0.15 mol/L NaCl al tampón.
(8) Según el peso molecular de la proteína objetivo, se selecciona el medio más cercano al rango de separación mediana.
(9) El caudal debe controlarse estrictamente durante el proceso de elución, y no demasiado rápido.
(10) Durante la carga y todo el proceso de elución, se evita que la superficie del cilindro se seque.
(11) Este producto debe evitar el contacto con los agentes oxidantes y evitar la exposición prolongada al aire.
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Sunresin Park, No 135, jinye Road, Zona de Desarrollo Industrial de Alta Tecnología de Xi'an, Shaanxi-710076, China 
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