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CM Seplife® FF

Matriz de agarosa, grupo CM, flujo rápido, equivalente a CM Sepharose FF
Descripción del producto

Resina de cromatografía de agarosa

CM seplife FF

Perfil del producto:
El medio de cromatografía CM seplife® FF es un nuevo tipo de medio de cromatografía de agarosa altamente reticulado desarrollado independientemente por Sunresin. Es un catión débil formado por la unión de grupos carboximetilo al medio de cromatografía de filtración en gel de agarosa.Medios de cromatografía de intercambio iónico. Tiene alta tasa de flujo, baja contrapresión, alta carga dinámica, buena estabilidad química y propiedades mecánicas, baja adsorción no específica, alta tasa de recuperación, fácil de escalar, puede acortar el tiempo de producción y mejorar la eficiencia de producción. Ampliamente utilizado enpurificación por cromatografía de intercambio iónicode proteínas aguas abajo,ácidos nucleicosypéptidosenbiofarmacéuticos y bioingeniería.

Resina de cromatografía de agarosa

Parámetros de resina:

Código de resina CM Seplife®FF
Apariencia Cuentas Esfera Blanca
Tamaño de partícula(μm) 45 ~ 165
Matriz Seplife 6FF
Tasa de flujo (cm / h) <750
Presión (MPa) 0.3
Resistencia al calor 121 ℃, en agua durante 30 minutos
estabilidad del pH 4 ~ 13 (largo plazo), 3 ~ 14 (corto plazo, CIP)
Solicitud Proteínas, ácidos nucleicos y péptidos posteriores
de biofarmacéuticos y bioingeniería
Estabilidad química Estable en los siguientes líquidos: todos los tampones acuosos comunes; 1 mol / L de hidróxido de sodio; Urea 8 mol / L; Clorhidrato de guanidina 8 mol / L;
Etanol al 70%
Adsorción (mg / ml) 60 mg / ml de lisozima / ml
Capacidad de intercambio de iones 0,09 ~ 0,13 mmol / ml
Temp de trabajo 4 ~ 40 ℃
Condiciónes de la prueba: Columna de cromatografía de 16 mm * 300 mm; Altura del lecho de la columna 15 cm; temperatura 25 ℃;
la fase móvil fue 0,1 mol / L de NaCl.


Instrucción de prueba:
1.Embalaje de columna
Operación de empaque de acuerdo con los procedimientos operativos estándar. Debe asegurarse de que cada material esté a la temperatura de trabajo y el gel debe desgasificarse antes del envasado.
2.Balance
Equilibre la columna con 2 a 5 veces el volumen del lecho de la solución de equilibrio de carga. Asegúrese de que la conductividad y el pH del efluente sean exactamente iguales a la conductividad y el pH del tampón de carga. La solución de equilibrio es una solución tampón de baja concentración, como Tris, PBS, etc.
3.carga
(1) La muestra se prepara con la solución de equilibrio, y la muestra turbia debe centrifugarse y filtrarse antes de cargarla. Las muestras con demasiada concentración de sal se preparan después del procesamiento.
(2) Generalmente, el producto objetivo se une a la columna, las impurezas se eliminan con la solución de equilibrio y luego se selecciona el eluyente para lavar el producto objetivo.
(3) El grado en que el medio adsorbe los componentes de la muestra depende de las propiedades cargadas de la muestra, la fuerza iónica de la fase móvil y el valor del pH. La concentración de sal es pequeña y el medio adsorbe los componentes de la muestra con más firmeza. Cuando se utilizan medios de cromatografía CM, el valor de pH recomendado es 1 unidad mayor que el punto isoeléctrico del producto objetivo.
4 elución
Aumente la concentración de sal o aumente el valor de pH para la elución, que se usa comúnmente para aumentar la concentración de sal.
5.Regeneración
Generalmente, lave primero con un tampón de alta concentración de sal (que contenga 1 ~ 2 mol / L de NaCl) o reduzca el pH en más de 10 veces el volumen de la columna, y luego lave hasta el equilibrio con la solución de equilibrio cuando se une la proteína.
Si hay proteínas o lípidos inactivados que no se pueden lavar durante la regeneración, se pueden eliminar con CIP.
6.Limpieza en su lugar
(1) Para la proteína unida por enlace iónico, se puede eliminar en 0,5 ~ 1 veces el volumen del lecho de NaCl 2M.
(2) Para proteínas precipitadas, proteínas o lípidos unidos hidrofóbicamente, primero puede enjuagar con un volumen de lecho 1 M de NaOH 0,1 M y luego lavar con solución tampón de equilibrio hasta que el pH sea neutro.
(3) Para proteínas y lípidos con fuerte unión hidrófoba, lavar con 4 a 10 veces el volumen del lecho de etanol al 70% o alcohol isopropílico al 30%. Cabe señalar que la concentración de disolvente orgánico aumenta gradualmente de forma gradiente, de lo contrario es fácil que se generen burbujas.
7.Almacenamiento
Sellado y almacenado a 4 ~ 30 ℃ (la solución de conservación es etanol al 20%) en un lugar seco, ventilado y limpio, y no se puede congelar; las columnas usadas se almacenan a 4 ~ 8 ℃, solución de etanol al 20%.
8.Transporte
Evite la luz solar, la lluvia y la fuerte presión durante el transporte, y está estrictamente prohibido transportar con materiales tóxicos y nocivos.


Asuntos que necesitan atención:
(1) Selección de columna: en teoría, siempre que la columna sea lo suficientemente larga, puede obtener la resolución ideal, pero debido a que el caudal de la columna está relacionado con el gradiente de presión, aumentar la longitud de la columna hace que el caudal sea más lento, el pico se amplía y la resolución Disminuye; el diámetro de la columna aumenta, de modo que aumenta la irregularidad del flujo de líquido y la resolución disminuye significativamente. UNA
(2) El pH y la fuerza iónica del tampón de elución deben controlarse estrictamente durante el proceso de purificación. La muestra y el medio de cromatografía CM deben equilibrarse completamente con tampón de elución antes de la cromatografía en columna. UNA
(3) El lecho de la columna instalado debe ser plano y libre de canales y burbujas, de lo contrario debe reinstalarse.
(4) El caudal debe controlarse estrictamente durante la elución y no demasiado rápido.
(5) El volumen de la muestra debe ser pequeño y la concentración no debe ser demasiado alta.
(6) Evite que el cilindro se seque durante la adición de la muestra y durante todo el proceso de elución.

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