Resina de cromatografía de agarosa
CM SEPLIFE FF
CM SEPLIFE® FF Agarose cromatografía Perfil de producto de resina:
El medio de cromatografía CM Seplife® FF es un nuevo tipo de medio de cromatografía de agarosa altamente reticulado desarrollado independientemente por Sunresin. Es un catión débil formado por los grupos carboximetilo de unión al medio de cromatografía de filtración en gel de agarosa. Medios de cromatografía de intercambio iónico. Tiene alta velocidad de flujo, baja presión de la espalda, alta carga dinámica, buena estabilidad química y propiedades mecánicas, baja adsorción no específica, alta tasa de recuperación, fácil de ampliar, puede acortar el tiempo de producción y mejorar la eficiencia de producción. Ampliamente utilizado en purificación de cromatografía de intercambio iónico de proteínas aguas abajo, ácidos nucleicos y péptidos en biofarmacéuticos y bioingeniería.
CM SEPLIFE® FF Agarose cromatografía Parámetros de resina:
| Código de resina | CM SEPLIFE® FF |
| Apariencia | Cuentas de la esfera blanca |
| Tamaño de partícula(μm) | 45 ~ 165 |
| Matriz | SePlife 6ff |
| Caudal (cm/h) | <750 |
| Presión (MPA) | 0.3 |
| Resistencia al calor | 121 ℃, en agua durante 30 minutos |
| estabilidad de pH | 4 ~ 13 (a largo plazo), 3 ~ 14 (a corto plazo, CIP) |
| Solicitud | Proteínas, ácidos nucleicos y péptidos aguas abajo
de biofarmacéuticos y bioingeniería |
| Estabilidad química | Estable en los siguientes líquidos: todos los amortiguadores acuosos comunes; 1 mol/l hidróxido de sodio; 8 mol/l de urea; 8 mol/l de clorhidrato de guanidina;
70% de etanol |
| Adsorción (mg / ml) | 60 mg/ml de lisozima/ml |
| Capacidad de intercambio iónico | 0.09 ～ 0.13 mmol /ml |
| Temperadora de trabajo. | 4 ~ 40 ℃ |
Condiciónes de la prueba: Columna de cromatografía 16 mm * 300 mm; Altura de la cama de columna 15 cm; temperatura 25 ℃;
La fase móvil fue de 0.1 mol / L NaCl. |
CM SEPLIFE® FF Agarose cromatografía instrucción de prueba de resina:
1. Embalaje de columna
Operación de embalaje de acuerdo con los procedimientos operativos estándar. Debe asegurarse de que cada material esté a temperatura de trabajo, y el gel debe desgasificarse antes de empacar.
2.Balance
Equilibrar la columna con 2 a 5 veces el volumen de la cama de la solución de equilibrio de carga. Asegúrese de que la conductividad y el pH del efluente sean exactamente los mismos que la conductividad y el pH del tampón de carga. La solución de equilibrio es una solución de tampón de baja concentración, como Tris, PBS, etc.
3. Cargue
(1) La muestra se prepara con la solución de equilibrio, y la muestra turbia debe centrifugarse y filtrarse antes de cargar. Las muestras con demasiada concentración de sal se preparan después del procesamiento.
(2) En general, el producto objetivo está unido a la columna, las impurezas se eliminan con la solución de equilibrio y luego el eluyente se selecciona para lavar el producto objetivo.
(3) El grado en que el medio adsorbe los componentes de la muestra depende de las propiedades cargadas de la muestra, la resistencia iónica de la fase móvil y el valor de pH. La concentración de sal es pequeña, y el medio adsorbe los componentes de la muestra más firmemente. Cuando se usa medios de cromatografía CM, el valor de pH recomendado es 1 unidad mayor que el punto isoeléctrico del producto objetivo.
4.Elución
Aumente la concentración de sal o aumente el valor de pH para la elución, comúnmente utilizado para aumentar la concentración de sal.
5. Regeneración
En general, primero lave con un tampón de concentración de sal alto (que contiene 1 ~ 2mol/L NaCl) o reduzca el pH en más de 10 veces el volumen de la columna, y luego lave al equilibrio con la solución de equilibrio al unir la proteína.
Si hay proteínas o lípidos inactivados que no se pueden lavar durante la regeneración, se pueden eliminar con CIP.
6. Llegar en su lugar
(1) Para la proteína unida por la unión iónica, se puede eliminar 0.5 ~ 1 veces el volumen de lecho de 2 m NaCl.
(2) Para las proteínas precipitadas, proteínas o lípidos unidos hidrófobicamente, primero puede enjuagar con un volumen de lecho de 1M de NaOH 0.1M, y luego lavar con solución de tampón de equilibrio hasta que el pH sea neutral.
(3) Para proteínas y lípidos con una fuerte unión hidrofóbica, lave con 4 a 10 veces el volumen de la cama de etanol al 70% o al 30% de alcohol isopropílico. Cabe señalar que la concentración de solvente orgánico aumenta gradualmente de manera gradiente; de lo contrario, se generan burbujas fáciles.
7.macenaje
Sellado y almacenado a 4 ~ 30 ℃ (la solución de preservación es al 20% de etanol) en un lugar seco, ventilado, limpio y no se puede congelar; Las columnas usadas se almacenan a 4 ~ 8 ℃, solución de etanol al 20%.
8.Transportación
Evite la luz solar, la lluvia y la fuerte presión durante el transporte, y está estrictamente prohibido transportar con materiales tóxicos y dañinos.
CM SEPLIFE® FF Agarose cromatografía resina importa que necesiten atención:
(1) Selección de columna: en teoría, mientras la columna sea lo suficientemente larga, puede obtener la resolución ideal, pero debido a que la velocidad de flujo de la columna está relacionada con el gradiente de presión, aumentar la longitud de la columna hace que la velocidad de flujo sea más lenta, el pico se amplía y la resolución disminuye; El diámetro de la columna aumenta, de modo que la desigualidad del flujo de líquido aumenta y la resolución disminuye significativamente. A
(2) El pH y la fuerza iónica del tampón de elución deben controlarse estrictamente durante el proceso de purificación. La muestra y el medio de cromatografía CM deben equilibrarse completamente con el tampón de elución antes de la cromatografía de columna. A
(3) El lecho de la columna instalada debe estar plana y libre de canales y burbujas, de lo contrario, debe reinstalarse.
(4) El caudal debe controlarse estrictamente durante la elución, y no demasiado rápido.
(5) El volumen de la muestra debe ser pequeño, y la concentración no debe ser demasiado alta.
(6) Evite que el cilindro se seque durante la adición de la muestra y todo el proceso de elución.
Français
Sunresin Park, No 135, jinye Road, Zona de Desarrollo Industrial de Alta Tecnología de Xi'an, Shaanxi-710076, China 
Envíenos un correo electrónico:
Llámanos al: